TINCION DE BAAR

                    Tinción de Ziehl Neelsen

La tinción de Ziehl-Neelsen(BAAR) es una técnica de tinción diferencialrápida y económica, para la identificación de microorganismos patógenos, por ejemplo M. tuberculosis .Fue descrita por primera vez por dos médicos alemanes, Franz Ziehl (1859 a1926), un bacteriólogo y Friedrich Neelsen (1854 to 1894), un patólogo.

1.- Fundamento

Este método se basa en que las paredes celulares de ciertos parásitos ybacterias contienen ácido graso|ácidos grasos (por ejemplo, el ácido micólico)de cadena larga (50 a 90 átomos de carbono) que les confieren la propiedad deresistir la decoloración con alcohol-ácido, después de la tinción con colorantesbásicos. Por esto se denominan ácido-alcohol resistencia|bacilos ácido-alcoholresistentes o BAAR. Las Mycobacterium|micobacterias como

Mycobacteriumtuberculosis|M. tuberculosis y Mycobacterium marinum|M. marinum y losparásitos coco (bacteria)|coccídeos como Cryptosporidium se caracterizan por sus propiedades de ácido-alcohol resistencia. La coloración clásica de Ziehl-Neelsen requiere calentamiento para que el colorante atraviese la paredbacteriana que contiene ceras.

2.- Técnica

Esta técnica puede realizarse tanto en muestras histológicas como citológicas.

2.1 - Variante histológica

Para demostrar la presencia de BAAR en cortes de tejido en parafina. Losreactivos necesarios para su realización son los siguientes:

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Ø  Ácido periódico 5%



Ø  Carbol fucsina de Ziehl (fucsina fenicada). Preparar mezclando en elorden dado:

a)     a)0,5 g fucsina básica

b)     b)50 cc agua destilada

c)     c)5 cc etanol absoluto

d)     d)2,5 g cristales de fenol derretidos



Ø  Hematoxilina



a)     Alcohol ácido 1%:

        b) Alcohol de 70º

·         Ácido clorhídricoEl procedimiento es el siguiente:

·         Desparafinar e hidratar los cortes

·         Ácido periódico 5%, 10 min

·         Lavar con agua destilada

·         Fucsina fenicada, 15 min

·         Decolorar en alcohol ácido al 1%

·         Lavar con agua destilada

·         Hematoxilina, 10 min

·         Azulidificar con, por ejemplo, carbonato de litio

·         Deshidratar, aclarar y montar preparaciones